重组噬菌体Qβ衣壳蛋白在大肠杆菌的可溶表达、自组装、纯化及鉴定

摘要

目的 实现噬菌体Qβ衣壳蛋白在大肠杆菌中的可溶表达以及衣壳蛋白在大肠杆菌胞内自组装成为完整的Qβ衣壳蛋白颗粒结构。方法 基于离子交换层析联合凝胶过滤层析，成功建立了从大肠杆菌破碎上清复杂体系中高效纯化重组Qβ蛋白颗粒的方法，获得纯度高于95%的重组蛋白颗粒。结果 通过基质辅助激光解吸时间飞行质谱、圆二色光谱、荧光发射光谱、分子排阻色谱和透射电子显微镜等表征手段确认了所得重组Qβ衣壳蛋白亚基结构折叠正确，蛋白颗粒结构组装均一、表观形态完整。结论 构建了重组Qβ衣壳蛋白表达载体Qβ-pET30a,并成功实现了重组Qβ衣壳蛋白在大肠杆菌胞内的可溶表达和蛋白颗粒结构自组装。

关键词

噬菌体 / Qβ衣壳蛋白 / 大肠杆菌 / 可溶表达 / 自组装 / 蛋白颗粒组装