基于Hippo/YAP通路研究槲皮素体内外抗肝纤维化作用

摘要

目的 研究槲皮素的抗肝纤维化作用及机制。方法 建立小鼠肝纤维化模型，分为空白组、模型组、阳性组(水飞蓟素100 mg·kg^-1)及槲皮素低、中、高剂量组(50、100、200 mg·kg^-1)。体外试验以HSC-T6为研究对象，分为对照组、TGF-β组及槲皮素低、中、高浓度组(40、60、80μmol·L^-1)。采用HE染色、Masson染色观察肝脏组织病理情况。采用RT-qPCR、Western blotting检测肝纤维化相关因子α-SMA、CollagenⅠ、Hippo/YAP通路相关因子及miRNA-204 mRNA的表达情况；流式细胞术检测HSC-T6的凋亡情况。结果 病理染色显示不同剂量槲皮素能够改善肝纤维化情况。RT-qPCR显示：与对照组比较，TGF-β组α-SMA、CollagenⅠ、YAP、NUAK1 mRNA的表达显著升高，MST1、LATS1 mRNA的表达显著降低，miRNA-204 mRNA表达降低；与TGF-β组比较，槲皮素各给药组α-SMA、CollagenⅠ、YAP、NUAK1 mRNA的表达明显降低，MST1、LATS1 mRNA的表达显著升高，miRNA-204 mRNA的表达明显升高；Western blotting结果显示各因子表达趋势与RT-qPCR结果一致。流式细胞术凋亡检测显示：与TGF-β组比较，槲皮素各给药组HSC-T6的总凋亡情况显著升高。结论 槲皮素在体内具有显著的抗肝纤维化作用，在体外能够抑制HSC-T6活化并促进其凋亡，可能是通过调控miRNA-204来调节Hippo/YAP信号通路实现的。

关键词

槲皮素 / 肝纤维化 / HSC-T6细胞 / miRNA-204 / Hippo/YAP信号通路 / 凋亡