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摘要
为探索免疫亲和柱串联高效液相色谱(immunoaffinity column-high performance liquid chromatography,IAC-HPLC)监测IAC柱容量的方法,本研究利用赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)与乙二胺发生缩合反应,纯化获得高纯度OTA结构修饰物(OTA-X),通过光谱、质谱对其进行了鉴定,以IAC的抗体建立了酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),测得OTA与OTA-X在竞争抑制曲线的IC50值分别为0.71和9.97 ng·mL-1,表明OTA-X与抗体的亲和力低于OTA。以OTA-X作为IAC柱容量的示踪物,建立了IAC-HPLC方法,监测添加不同浓度的OTA-X和OTA在IAC的回收率。结果表明:在柱容量范围内,OTA的回收率大于80%,而OTA-X的回收率随着OTA的增加而降低,总结合量大于柱容量,说明OTA-X可以作为IAC柱容量的示踪物监测柱容量,且不影响OTA的检测结果,为提高OTA检测的准确度提供了新方法。
关键词
免疫亲和柱
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柱容量
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赭曲霉毒素A
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结构修饰物
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高效液相色谱
Key words
赭曲霉毒素A结构修饰物监测免疫亲和柱容量[J].
南昌大学学报(理科版), 2025, 49(01): 76-81 DOI:10.13764/j.cnki.ncdl.2025.01.011