微孔板法筛查RhCE抗原关键参数及RHCE基因多态性分析

杨红梅; 陈敏洁; 邹昕; 马思飞; 熊玉琪; 邹书英

doi:10.19767/j.cnki.32-1412.2025.01.003

交通医学 ›› 2025, Vol. 39 ›› Issue (01) : 13 -17. DOI: 10.19767/j.cnki.32-1412.2025.01.003

微孔板法筛查RhCE抗原关键参数及RHCE基因多态性分析

杨红梅, 陈敏洁, 邹昕, 马思飞, 熊玉琪, 邹书英

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摘要

目的：研究适合微孔板法检测RhCE抗原的最优条件，分析常州地区献血人群RHCE基因型及表型特征。方法：选取2 558例无偿献血者血标本，以试管法为标准，凝集试验为原理，研究微孔板法不同抗体容量、红细胞浓度及振荡频率、时间对反应结果的影响，建立试验反应和关键参数。对RhCE抗原弱表达样本进行RHCE基因10个外显子测序。结果：选取待检红细胞浓度为4%、单克隆试剂抗体容量比例为1∶1的反应体系，按1 100 r/min频率震荡120 s、450 r/min频率震荡900 s、1 100r/min震荡60 s和30 r/min震荡180 s 4次，读取的结果与手工试管法一致率达99.96%。2 558例中表型CCDee占43.47%,CcDEe占35.49%,ccDEE占8.37%,CcDee占8.21%,ccDEe占3.05%,CCDEe占0.71%,ccDee占0.39%,CcDEE占0.31%，未见CCDEE表型。10例RHCE抗原弱表达基因多态性为RHCE*01/*03和RHCE*04/*03，发现1例RHCE*04/*02*new。结论：RhCE抗原在献血人群中具有基因多态性特征，存在稀有基因型，建立微孔板法筛查RhCE抗原试验关键参数为大规模筛查献血人群中RHCE基因多态性提供试验方法。新核苷酸突变位点为RHCE变异型发生机制研究提供样本来源，为RHCE精准输血提供基础。