EGFR-TKI耐药后AKT/Ets1调控PD-L1的表达介导非小细胞肺癌免疫逃逸的机制探究

摘要

目的 ：探讨表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）驱动基因突变的非小细胞肺癌患者在EGFR酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor,TKI）奥希替尼耐药后免疫治疗的效果，以及程序化死亡配体1(programmed cell death ligand 1,PD-L1)表达上调的分子机制。方法：回顾性分析奥希替尼耐药非小细胞肺癌患者接受免疫联合治疗的临床效果。构建奥希替尼耐药非小细胞肺癌细胞株PC9-OR和HCC827-OR，通过MTT和克隆形成实验验证其耐药性。采用Western Blot实验检测耐药细胞中E26转化特异性转录因子1(E26 transformationspecific sequence 1,Ets1)及PD-L1蛋白的表达。在耐药细胞中使用AKT抑制剂（Dactolisib和LY294002），评估AKT通路对Ets1及PD-L1表达的调控作用。分析siRNA干扰Ets1表达结合AKT抑制剂（LY294002）对PD-L1表达的影响。采用免疫组织化学方法检测奥希替尼耐药前后患者石蜡包埋组织中Ets1及PD-L1的表达变化。结果：免疫联合治疗显著延长奥希替尼耐药非小细胞肺癌患者的无进展生存期。PC9-OR及HCC827-OR细胞具有奥希替尼耐药性，其中AKT通路活化，伴随Ets1及PD-L1表达上调。患者耐药后石蜡组织中Ets1和PD-L1的表达升高。结论：奥希替尼耐药引起AKT通路激活，促进Ets1表达上调，进而驱动PD-L1表达增加，增强患者对免疫治疗疗效，为免疫联合治疗提供了理论依据。

关键词

非小细胞肺癌 / 奥希替尼 / 蛋白激酶B / E26转化特异性转录因子1 / 程序化死亡配体1