基于HPLC-Q/TOF MS与网络药理学结合分子对接技术探讨清肺汤入血成分的镇咳作用机制

摘要

目的 建立基于HPLC-Q/TOF MS的方法鉴定清肺汤的活性成分，并基于网络药理学的方法寻找清肺汤镇咳的潜在活性机制。方法 将10只Wistar大鼠连续灌胃7 d给予清肺汤水煎液后，收集2 h的血浆。样品前处理后，用ACQUITY HPLC HSS Column(100 mm×3.0 mm, 1.8μm)色谱柱以质量分数为0.2%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相，梯度洗脱。在电喷雾离子源(ESI源),正负离子模式下分析入血成分；通过SwissTargetPrediction数据库筛选入血成分的潜在靶标，与在GeneCards数据库、CTD数据库和Open Targets Platform数据库中筛选得到的咳嗽靶标匹配获取交集靶标；通过Metascape数据库进行GO生物学分析和KEGG通路分析；通过STRING数据库与Cytoscape软件绘制PPI网络，通过节点和边缘集群算法寻找核心靶点，并用分子对接进行验证。结果 通过入血成分的定性分析，检测出了59个活性成分，99个清肺汤镇咳的潜在靶标。GO分析表明清肺汤发挥镇咳作用主要富集在刺激反应与代谢调控等生物过程，细胞膜、神经突触等细胞组成，结合功能、激酶活性等分子功能。关键通路多与免疫调节、炎症反应以及气道反应和气道重塑有关。筛选出BCL2L1、JUN、STAT3、MMP9、HIF1A等核心靶点。结论 清肺汤通过多成分、多靶点、多通路发挥镇咳作用。

关键词

清肺汤 / 镇咳 / HPLC-Q/TOF MS / 入血成分 / 网络药理学 / 分子对接