刺五加苷B对高糖诱导H9c2心肌细胞损伤的防治作用及其机制研究

摘要

目的 基于氨基己糖生物合成途径（the hexosamine biosynthesis pathway, HBP）探讨刺五加苷B对高糖诱导H9c2心肌细胞损伤的防治作用及作用机制。方法 体外培养H9c2大鼠心肌细胞，随机分组为对照组、模型组、模型+溶剂组、模型+刺五加苷B低、中、高剂量组。采用CCK-8法筛选刺五加苷B最佳给药浓度；分光光度法检测各组细胞GDH活性。免疫荧光法（IF）检测各组细胞GLUT4的表达。实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time fluorescence quantitative-polymerase chain reaction, qRT-PCR）及免疫印迹法（Western-blot, WB）检测GLUT4及HBP通路在各组细胞中的表达。结果 CCK-8结果显示，刺五加苷B质量浓度在5～100μg·mL^-1内对H9c2细胞无细胞毒性。与对照组比较，模型组GLUT4蛋白表达、mRNA表达均显著降低，O-GLcNAc、OGT、GFAT蛋白表达显著升高（P<0.01）;经刺五加苷B干预后，与模型组比较，GLUT4蛋白表达、mRNA表达均显著升高（P<0.05或P<0.01）,O-GLcNAc、OGT、GFAT蛋白表达显著降低（P<0.05或P<0.01）。结论 刺五加苷B可有效地增强心肌细胞中GLUT4的转运能力，同时降低心脏组织脂质沉积，改善经高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤。其机制可能是通过影响HBP限速酶GFAT的表达，调控HBP的流量，降低异常升高的O-GlcNAc水平来完成其防治作用。

关键词

刺五加苷B / H9c2心肌细胞 / 糖尿病心肌病 / 氨基己糖生物合成途径