紫锥花苷预处理通过PI3K/Akt/Nrf2/HO-1信号通路改善大鼠肝脏缺血再灌注损伤

摘要

目的 探讨预防性使用紫锥花苷对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法 SPF级健康雄性SD大鼠32只，随机分为假手术组（Sham ）、缺血再灌注组（IR）、IR+紫锥花苷30 mg·kg^-1组（IR+ECH30）、IR+紫锥花苷60 mg·kg^-1组（IR+ECH60），腹腔注射给药，末次给药2 h后建立70%缺血的HIRI模型，再灌注6 h后收集肝脏样本及血清。MRI扫描大鼠肝脏，序列为T1WI、T2WI、Perfusion;全自动生化分析仪进行ALT、AST水平测量; HE染色与电镜观察肝组织变化; ELISA试剂盒测定血清中MDA、SOD、IL-1β、TNF-α的水平;免疫组化法分析Casepase-3蛋白表达水平; TUNEL法检测肝细胞凋亡程度; Western-blot法检测HO-1、Casepase-3、p-AKT、PI3K、Nrf-2、AKT蛋白表达水平。结果 MRI扫描显示，ECH使用后导致肝脏T2WI信号减弱，ADC值增加。生化分析显示，ECH应用后血清ALT、AST水平下降。HE染色和电镜观察显示，ECH明显减轻IR引起的干细胞坏死和免疫细胞浸润。ELISA分析显示，与IR组相比，IR+ECH30、IR+ECH60组血清中MDA、IL-1β、TNF-α含量下降，SOD水平升高。免疫组化分析显示，IR+ECH30组、IR+ECH60组Casepase-3阳性面积占比较IR组减少。此外，IR+ECH30组、IR+ECH60组的肝细胞凋亡数量较IR组减少。Western-blot分析显示，ECH使用后导致IR模型中Nrf-2、HO-1、PI3K、p-AKT蛋白升高，Casepase-3蛋白降低。结论 预防性使用紫锥花苷可以通过激活PI3K/Akt/Nrf2/HO-1信号通路抑制HIRI导致的氧化应激、炎症反应以及肝细胞凋亡使大鼠肝脏缺血再灌注损伤减轻

关键词

紫锥花苷 / 肝脏缺血再灌注损伤 / PI3K/Akt/Nrf2/HO-1信号通路