乌鸡白凤软胶囊中氨基酸类含量测定与特征性寡肽类成分分析

摘要

目的 采用超高效液相色谱-质谱联用技术对乌鸡白凤软胶囊中氨基酸类成分进行含量测定，对特征性寡肽类成分进行成分分析，完善乌鸡白凤软胶囊质量控制指标。方法 氨基酸含量测定和寡肽类成分分析均采用Acquity BEH Hilic色谱柱（100 mm×2.1 mm, 1.7μm）,以乙腈和体积分数0.1%甲酸水溶液(含10 mmol·L^-1甲酸铵)为流动相进行梯度洗脱。寡肽类成分的分析中采用偏最小二乘判别分析法（PLS-DA）对木瓜蛋白酶水解的乌鸡提取物和未经木瓜蛋白酶水解的乌鸡提取物样品中寡肽类成分进行分析，找出其主要特征性寡肽类成分。结果 所建立的氨基酸含量测定方法在考察范围内线性关系良好（r≥0.997 0）,具有较好的重复性和稳定性，加样回收率在86.0%～91.5%内，其中含量较高氨基酸为天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸和异亮氨酸（两氨基酸含量之和）、酪氨酸；寡肽类成分的分析中生成的得分图将3组样品很好的区分，其中根据VIP结果筛选出木瓜蛋白酶水解的乌鸡提取物特征性寡肽类成分为Asp-His-Ile-Val、Arg-Ile-Thr-Tyr、Arg-Ala、Gly-Glu-Pro-Arg、Arg-Gly-Pro-Tyr、His-Ala-Val-Val、Cyclo（-Ser-Tyr）、His-Phe-Ala、Asp-Gly-Ser-Trp、Gly-Lys、Gly-Pro-Ala、Gly-Gly-Phe、Ala-Leu-Gly、Lys-Leu、Ala-Asn-His-Thr、Pro-Glu-Leu-Phe、Pro-Glu-Leu-Phe、Lys-Lys-Lys-Val。结论 所建立的方法和实验结果为乌鸡白凤软胶囊药效物质基础的确定和后续研究提供了数据支持。

关键词

乌鸡白凤软胶囊 / 寡肽 / 氨基酸 / 高分辨质谱 / 串联四级杆质谱