基于网络药理学、分子对接与实验验证探讨凉心利水汤治疗良性前列腺增生诱导的下尿路症状的作用机制

摘要

研究背景网络药理学的“多成分、多靶标、多途径”模型构建理念，与中医理论的“整体观”相一致，能够更准确地预测和分析中药复方的作用机制。良性前列腺增生诱导的下尿路症状（benign prostatic hyperplasia/lower urinary tract symptoms, BPH/LUTS）的排尿期症状属于中医“癃闭”范畴，清代《辨证录》收录的“癃闭”方——凉心利水汤（LXLSD）,具有改善BPH/LUTS的潜在价值，其药理作用和分子机制值得进一步探讨。目的 运用网络药理学与分子对接的方法，探讨LXLSD治疗BPH/LUTS的作用机制。方法 通过查询中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）、本草组鉴（HERB）和BATMAN-TCM等数据库查询LXLSD的化合物成分；利用SwissADME网站分析这些成分的胃肠道吸收率、类药性与生物利用度评分；利用SwissTargetPrediction获取LXLSD的作用靶标；利用GeneCards^?疾病数据库获取治疗BPH/LUTS的作用靶标；利用R软件获取药物与疾病的交集靶标，并对交集靶标进行GO和KEGG富集分析；利用STRING平台对交集靶标构建蛋白质-蛋白质相互作用网络；利用Cytoscape软件构建药物-成分-靶标-通路网络，进一步利用分子对接技术验证LXLSD中主要成分与关键靶标的亲和力；通过体外观察LXLSD及主要成分对小鼠膀胱肌条收缩的抑制作用验证其对BPH/LUTS的疗效。结果 共得到LXLSD主要成分79个，其作用靶标881个；与BPH/LUTS相关的作用靶标906个，从中筛选出LXLSD治疗BPH/LUTS的靶标207个，其中相关度较高的靶标为MAPK1、EGFR、TNF、AKT1、ROCK1;各自相应的有效成分为观音莲明碱、莲心碱、鹅掌楸碱、穆坪马兜铃酰胺、甲基麦冬二氢高异黄酮A,分别与这5个靶标分子具有较强亲合力，可调控PI3K/AKT、细胞基质粘附、MAPK和钙信号等多条信号通路。离体组织实验表明，LXLSD对小鼠膀胱肌条收缩的具有明显的抑制作用；以Fas为对照分析其他3种药物的抑制作用，显著性差异分析表明，除IsoL外，Lien、Nef效果显著强于Fas。结论 LXLSD可能通过抑制膀胱平滑肌收缩等多重作用机制，从而发挥改善BPH/LUTS的作用。

关键词

凉心利水汤 / 良性前列腺增生 / 下尿路症状 / 网络药理学 / 分子对接