蛋白酶体亚基β6通过抑制JAK2/STAT3通路促进肾损伤的研究

摘要

目的 探究蛋白酶体亚基β6（recombinant proteasome subunit beta type 6,PSMB6）在急性肾损伤（acute kidney injury, AKI）中的作用机制。方法 建立氧-糖剥夺/恢复（oxygen-glucose deprivation/recovery, OGD/R）HK-2细胞损伤模型后，分别采用1.5μg·mL^-1 PSMB6干扰载体（PSMB6 short hairpin RNA,sh-PSMB6）和1.5μg·mL^-1 PSMB6过表达载体pcDNA-PSMB6转染细胞，以及转染pcDNA-PSMB6载体的同时添加3μmol·L^-1 JAK2/STAT3信号通路激活剂Butyzamide或2 mol·L^-1内质网应激抑制剂4-PBA,细胞培养48 h后检测PSMB6的表达水平、HK-2细胞的活力、凋亡率以及内质网应激和JAK2/STAT3信号通路的变化。建立缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）小鼠AKI模型后，将500μL PSMB6慢病毒干扰载体通过尾静脉注射到小鼠体内，并检测PSMB6的表达水平以及小鼠AKI情况。结果 OGD/R诱导的HK-2细胞中PSMB6表达上调，干扰PSMB6改善了OGD/R诱导的HK-2细胞活力的降低，并抑制细胞凋亡和内质网应激。此外，PSMB6显著抑制了JAK2/STAT3信号通路，Butyzamide和4-PBA的使用消除了PSMB6造成的HK-2细胞活力的降低和凋亡的增加。AKI模型小鼠肾组织中PSMB6表达上调，干扰PSMB6缓解了I/R模型小鼠的AKI。结论 PSMB6可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路来促进细胞凋亡和内质网应激进而加重AKI。

关键词

急性肾损伤 / 蛋白酶体亚基β6 / JAK2/STAT3信号通路 / 凋亡 / 内质网应激