灵芝多糖通过减弱癌相关成纤维细胞活性抑制肠癌转移的作用研究

摘要

目的 探讨灵芝多糖（Ganoderma lucidum polysaccharide,GLP）通过减弱癌相关成纤维细胞（cancer associated fibroblasts,CAFs）活性抑制肠癌转移的作用机制。方法 体外诱导建立肠癌CAFs模型，以不同浓度(50、100、200μg·mL^-1)GLP作用72 h,M TT法检测细胞活力，流式细胞法检测细胞凋亡率，RT-PCR法检测CAFs基因mRNA表达情况。体内尾静脉注射CT26细胞建立肠癌肺转移小鼠模型，以低、中、高剂量(25、50、100 mg·kg^-1) GLP干预14 d，解剖取肺组织计数转移灶数量，计算转移发生率，HE染色观察组织病变情况，免疫组化染色观察肺组织中α-SMA、FAP表达情况。结果体外实验结果表明，一定浓度范围内，GLP对CAFs细胞具有抑制效应，呈现剂量-效应关系; 200μg·mL^-1GLP能显著提升CAFs的早期凋亡比例和总体凋亡比例; 100μg·mL^-1和200μg·mL^-1的GLP能显著降低CAFs活性标志基因α-SMA、FAP mRNA表达水平，同时降低PD-L1、FGFR1、Smad2、TGF-β1基因mRNA表达水平。体内实验结果表明，与模型对照组相比，GLP能降低转移发生率，显著性减少转移灶数量，且呈剂量依赖地减轻肿瘤样细胞浸润和炎性细胞浸润;GLP能显著降低肺组织中活性CAFs特异性蛋白α-SM A、FAP表达水平（P<0.05,P<0.01）。结论 GLP具有抑制CAFs增殖、诱导CAFs凋亡、抑制CAFs活性的作用，并可能通过减弱CAFs活性抑制肠癌转移，其作用机制可能与TGFβ1/Smad2信号通路相关。

关键词

灵芝多糖 / 癌相关成纤维细胞 / 肠癌转移 / TGF-β1/Smad2

基金资助

四川省省级科研院所基本科研业务专项项目(A-2021N-5); 四川省十四五中药材育种攻关—灵芝新品种选育及配套技术研究项目(2021YFYZ0012); 四川省“天府万人计划”资助资金项目(川万人第407号); 国家现代农业产业技术体系四川道地中药材创新团队项目(SCCXTD-2024-19); 四川省科技计划资助项目(2024YFHZ0206)