银翘汤HPLC指纹图谱研究、化学模式识别及含量测定

摘要

目的 基于高效液相色谱法建立10批银翘汤指纹图谱，结合化学识别评价其质量，并同时测定银翘汤中没食子酸甲酯、绿原酸、葛根素、升麻素、甘草酸铵5种成分的含量。方法 分析采用Spherisorb ODS-2 C₁₈色谱柱（250 mm×4.0 mm, 5μm）;流动相为0.1%磷酸水（A）-乙腈（B）溶液，梯度洗脱；柱温为35℃;检测波长为254 nm;流速为1.0 mL·min^-1。使用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”、SPSS 19.0、SIMCA 13.0等软件建立指纹图谱、评价相似度并进行多元统计分析；通过外标法计算没食子酸甲酯、绿原酸、葛根素、升麻素、甘草酸铵5种成分的含量。结果 在254 nm下，标定出26个共有峰，指认出5个色谱峰，相似度范围为0.997～0.999;化学模式识别结果表明，10批银翘汤可分为2类，质量最高的批次为S9,并筛选出9个差异性标志物。没食子酸甲酯、绿原酸、葛根素、升麻素、甘草酸铵分别在各自范围内呈良好线性关系（r均大于0.999 8）,回收率范围为95.6%～100.8%,RSD为0.8%～1.7%,10批银翘汤中5种成分的含量分别为13.805～20.032 mg·L^-1、108.345～114.386 mg·L^-1、16.929～19.389 mg·L^-1、9.646～13.394 mg·L^-1、29.208～31.654 mg·L^-1。结论 建立的HPLC银翘汤指纹图谱及多成分含量测定分析方法稳定、简单、可靠，同时结合化学模式识别分析，可为银翘汤的质量控制提供参考。

关键词

银翘汤 / 中药指纹图谱 / 含量测定 / 化学模式识别