基于UPLC-Q-TOF-MS技术鉴定金钗石斛生物碱类成分及其活性研究

摘要

目的 采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术，快速而全面分析金钗石斛化学成分，初步探究金钗石斛生物碱(Dendrobium nobile Lindl. Alkaloid,DNAL)对三阴性乳腺癌细胞的作用及分子机制。方法 采用UPLC-Q-TOF-MS，分别在正、负离子扫描模式下对金钗石斛化学成分进行分析;采用CCK-8、划痕和小室侵袭实验检测DNAL对MDA-MB-231细胞的作用;采用RT-qPCR和Western blot方法探究DNAL对MDA-MB-231细胞作用的分子机制。结果 共鉴定出230种化学成分，其中生物碱类相对含量最高，共16种，占比33.73%。细胞实验结果表明，DNAL能够显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖、侵袭和转移。经DNAL处理的MDA-MB-231细胞中Claudin-1的表达显著上调，EGFR、STAT3、MMP-2、MMP-9、PIK3CA和AKT1的表达显著下调; EGFR和STAT3磷酸化水平显著降低，转移相关蛋白MMP-2、MMP-9和VEGFA的表达量显著降低。结论 DNAL可能通过调控EGFR/STAT3信号通路，降低转移相关蛋白MMP-2、MMP-9和VEGFA的表达来抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖、侵袭和转移。

关键词

金钗石斛 / 生物碱 / 三阴性乳腺癌 / 增殖 / 侵袭 / 转移 / 信号通路