绞股蓝总皂苷激活Atgl诱导结肠癌细胞凋亡的作用研究

摘要

目的 分析绞股蓝总皂苷（gypenosides, Gyp）对结肠癌HCT116细胞增殖的抑制作用，并阐明其机制。方法 采用Cell counting kit-8（CCK-8）法和流式细胞术检测细胞活力、细胞周期分布及凋亡率；采用实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real time polymerase chain reaction, qRT-PCR）和蛋白质印记（Western blot）分别检测mRNA和蛋白质表达水平；采用Bodipy染色检测脂滴数量。结果 Gyp呈浓度依赖性和时间依赖性抑制HCT116细胞增殖；Gyp显著增加G₀/G₁期HCT116细胞的比例，下调周期蛋白依赖性激酶（cyclin-dependent kinases, CDKs,包括CDK2、CDK4和CDK6）蛋白的表达水平并上调p21和p27蛋白的表达水平；Gyp显著增加凋亡的HCT116细胞的比例，上调活化型半胱氨酸蛋白酶-3（Cleaved caspase-3）、活化型聚（ADP-核糖基）转移酶1[Cleaved Poly（ADP-ribose）polymerase 1,Cleaved PARP1]和Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein, Bax）的表达水平并下调B淋巴细胞瘤-xl（B cell lymphoma-xl, Bcl-xl）蛋白的表达水平；Gyp显著降低HCT116细胞中脂滴的数量，下调脂肪酸合酶（fatty acid synthase,Fasn）mRNA的表达水平并上调甘油三酯脂酶（adipose triglyceride lipase, Atgl）mRNA及蛋白的表达水平；与Gyp单独处理相比，Gyp与阿格列他汀（Atgl inhibitor, Atgl抑制剂，简称Atgli）合用显著增加HCT116细胞中的脂滴数量、显著下调HCT116细胞的凋亡率，并降低Cleaved caspase-3的表达水平。结论 Gyp通过诱导细胞周期阻滞和凋亡抑制HCT116细胞增殖，其机制与Atgl介导的脂代谢有关。

关键词

绞股蓝总皂苷 / 结肠癌 / 细胞周期 / 凋亡 / 脂代谢