基于线粒体自噬-NLRP3炎症小体途径探索丹蒌片的“双心”效应机制

摘要

目的 探讨丹蒌片通过调控线粒体自噬-NLRP3炎症小体通路改善心血管疾病与抑郁共病（“双心”疾病）的作用机制。方法 构建慢性心肌缺血联合慢性不可预知性轻度应激（chronic unpredictable mild stress, CUMS）复合大鼠模型，随机分为空白对照组、模型组、丹蒌片组(0.5 g·kg^-1)和3-MA组(自噬抑制剂，15 mg·kg^-1)。通过糖水偏好实验、强迫游泳试验评估抑郁样行为，通过酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA）检测血清心肌损伤标志物肌酸激酶（creatine kinase, CK）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase-MB,CK-MB）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）、心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I,cTnI）、神经递质5-羟色胺（5-hydroxytryptamine, 5-HT）、多巴胺（dopamine, DA）和炎症因子水平，通过蛋白质印迹法（Western blot）分析海马组织自噬相关蛋白（microtubule-associated protein 1 light chain 3 isoform-Ⅱ/Ⅰ,LC3-Ⅱ/Ⅰ）、Beclin-1、p62及NLRP3炎症小体通路（NOD-like receptor family pyrin domain containing3,NLRP3）、cleaved-caspase-1、白细胞介素-1（interleukin-1,IL-1β）、白细胞介素-18（interleukin-18,IL-18）表达。结果 丹蒌片干预显著改善模型大鼠快感缺失（蔗糖偏好率提升61.2%）和行为绝望（强迫游泳静止时间缩短53.5%）,降低心肌损伤标志物（CK-MB下降38.6%,cTnI下降33.8%）,同时下调血清IL-1β水平（下降25.5%）并提升5-HT（107.8%）和DA（75.7%）含量。研究显示，丹蒌片通过抑制自噬过度激活，降低LC3-II/I比值及NLRP3炎症小体通路NLRP3及下游cleaved caspase-1、IL-1β及IL-18表达水平，阻断Toll样受体4/核转录因子-κB（Toll-like rcecptor 4/nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells, TLR4/NF-κB）信号转导，减少p65核转位。结论 丹蒌片通过调控线粒体自噬-NLRP3/NF-κB炎症轴，同步改善心肌缺血损伤和抑郁样行为，其“双心”保护效应可能与抑制神经炎症-单胺递质失衡的交互作用相关，为中药多靶点治疗心身共病提供理论依据。

关键词

丹蒌片 / 慢性心肌缺血 / 慢性温和不可预知应激 / NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3 / 线粒体自噬