B7-H4活化NF-κB/IL-6/STAT3途径促进MFC细胞增殖和肿瘤形成

摘要

目的 探究协同共刺激分子B7-H4对MFC细胞增殖、迁移以及肿瘤形成的影响并探究其可能的作用机制。方法 Western blot检测MFC细胞中B7-H4的表达水平，通过慢病毒转染敲低MFC细胞中B7-H4的表达并筛选稳转细胞株，转染B7-H4敲低慢病毒为实验组(sh-B7-H4),转染空载慢病毒为对照组(sh-NC)。通过CCK-8、细胞划痕实验检测敲低B7-H4对MFC细胞增殖和迁移能力的影响。通过小鼠皮下成瘤实验探究敲低B7-H4对肿瘤形成的影响；RT-PCR和Western blot检测敲低B7-H4后，B7-H4、NF-κB、IL-6、STAT3等基因在细胞和肿瘤组织中表达水平的变化。结果 RT-PCR和Western blot检测结果显示，相较于sh-NC组，sh-B7-H4组的B7-H4表达水平降低(P<0.001),成功构建B7-H4敲低的细胞株。MFC细胞敲低B7-H4后，CCK-8实验结果显示，sh-B7-H4组较sh-NC组细胞增殖能力明显被抑制(P<0.001);细胞划痕实验结果显示，sh-B7-H4组较sh-NC组细胞迁移能力明显降低(P<0.001)。小鼠皮下成瘤实验中，实验组中小鼠的肿瘤体积及重量明显低于对照组(P<0.001)。RT-PCR和Western blot结果表明，在MFC细胞和小鼠肿瘤组织中，相较于sh-NC组，sh-B7-H4组中B7-H4、p-NF-κB、IL-6、p-STAT3的表达水平降低(P<0.001),而总NF-κB、总STAT3的表达水平没有显著变化(P>0.05)。结论 低表达B7-H4抑制MFC细胞的增殖和迁移能力，同时抑制MFC细胞肿瘤的形成，这种抑癌的作用机制可能是通过阻断NF-κB/IL-6/STAT3途径的激活而实现的。

关键词

B7-H4 / 细胞增殖 / 细胞迁移 / 肿瘤形成 / NF-κB/IL-6/STAT3