Nrf2参与CaMKII抑制引起的神经细胞毒性作用

摘要

目的 探讨Ca²⁺/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKII）的特异性抑制剂KN93对神经细胞的作用及其与Nrf2通路之间的关系。方法 培养小鼠脑神经瘤细胞N2a, CCK8检测确定给药12 h后KN93对细胞的毒性作用与浓度的相关性；应用5μmol KN93给药12 h后进行荧光NeuN染色，检测细胞存活率；应用ELISA试剂盒检测KN93对炎症因子TNF-α、IL-1β表达的影响；Western blot检测给药KN93后Nrf2蛋白表达的变化；ELISA试剂盒检测KN93与Nrf2拮抗剂ML385同时处理时，炎症相关因子TNF-α、IL-1β表达的变化。结果 与对照组相比，5μmol KN93给药12 h后，KN93给药组中NeuN染色的阳性细胞明显减少；TNF-α和IL-1β表达明显增加；Nrf2蛋白表达显著增加；与KN93给药组相比，KN93和Nrf2拮抗剂ML385同时处理组炎症相关蛋白表达下降，即Nrf2的抑制剂ML385能逆转KN93诱发的炎症反应。结论 Nrf2通过诱发炎性反应，参与CaMKII的抑制剂KN93引起的神经细胞毒性作用。

关键词

Ca²⁺/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ / KN93 / 癫痫 / N2a / Nrf2