LncRNA LUCAT1介导的miR-199b-5p/MAPKAPK3轴在甲状腺乳头状癌发展中的调控作用及机制

摘要

目的 探究lncRNA LUCAT1对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡和EMT的影响，并进一步探究miR-199b-5p/MAPKAPK3轴在其中发挥的作用。方法 RT-qPCR检测甲状腺乳头状癌组织及癌旁组织中LUCAT1、miR-199b-5p和MAPKAPK3表达；生物信息学预测miR-199b-5p与LUCAT1或MAPKAPK3的潜在结合位点，双荧光素酶报告基因实验验证miR-199b-5p与LUCAT1或MAPKAPK3结合。将TPC-1细胞分为sh-NC组、sh-LUCAT1组、sh-LUCAT1+inhibitor NC组、sh-LUCAT1+miR-199b-5p inhibitor组和sh-LUCAT1+miR-199b-5p inhibitor+sh-MAPKAPK3组；Western blot检测各组细胞MAPKAPK3蛋白表达水平；CCK-8实验检测各组细胞增殖活性；流式细胞术检测各组细胞凋亡率；Transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力；Western blot方法检测各组细胞EMT相关蛋白表达水平。结果 甲状腺乳头状癌组织中LUCAT1和MAPKAPK3高表达，且miR-199b-5p低表达；miR-199b-5p与LUCAT1和MAPKAPK3结合；敲减LUCAT1降低TPC-1细胞MAPKAPK3表达，抑制TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,并促进细胞凋亡；抑制miR-199b-5p逆转了敲减LUCAT1对TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭和EMT的抑制作用及细胞凋亡的促进作用；敲减MAPKAPK3逆转了抑制miR-199b-5p对敲减LUCAT1的TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭和EMT的促进作用及细胞凋亡的抑制作用。结论 lncRNALUCAT1可能通过竞争结合miR-199b-5p上调MAPKAPK3表达促进甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT并抑制细胞凋亡。

关键词

LncRNA LUCAT1 / 甲状腺乳头状癌 / miR-199b-5p/MAPKAPK3轴 / 增殖 / 迁移 / 侵袭 / 凋亡 / 上皮间质转化