人脐带间充质干细胞源外泌体对血管内皮细胞缺氧-复氧损伤的保护作用

摘要

目的 研究人脐带间充质干细胞来源的外泌体（hUCMSCs-exo）对血管内皮细胞缺氧-复氧（H/R）损伤的保护作用。方法 取足月新生儿脐带中的华通氏胶以组织块贴壁法提取人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）,流式细胞术检测hUCMSCs表面标志物CD34、CD45、CD73、CD90、CD105,成脂、成骨实验检测hUCMSCs的分化能力。超速离心法提取hUCMSCs培养上清液中的外泌体，电镜检测hUCMSCs-exo的形态及Western blot检测hUCMSCs-exo的标志蛋白CD9、CD63。人脐静脉内皮细胞（HUVECs）经缺氧（1%O₂）培养12 h,然后常氧（95%空气）培养12 h,以建立H/R模型。实验分组：对照组、H/R组、hUCMSCs-exo组。台盼蓝染色检测细胞存活率；CCK-8检测HUVECs增殖能力；Transwell实验检测HUVECs的迁移能力、成血管实验检测HUVECs的成血管能力。结果 自华通氏胶中提取的干细胞CD73、CD90、CD105标记物表达阳性，CD34、CD45表达阴性，具有成脂、成骨分化能力。外泌体标志物CD9、CD63呈阳性表达。与对照组相比，H/R组活率降低，增殖、迁移、成血管能力下降，而hUCMSCs-exo提高了H/R后HUVECs的存活率，改善增殖能力、迁移能力和管腔形成能力。结论 hUCMSCs-exo对H/R导致的HUVECs的损伤具有保护作用。

关键词

人脐带间充质干细胞 / 外泌体 / 血管内皮细胞 / 缺氧-复氧