藏红花素通过PI3K/Akt/mTOR通路促进人肝癌HepG2细胞凋亡和自噬

摘要

目的 研究藏红花素对人肝癌HepG2细胞凋亡和自噬的影响及机制。方法 以不同浓度藏红花素（0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2 mmol/L）干预对数生长期HepG2细胞，48 h后MTT法检测细胞增殖抑制率，计算半抑制浓度(IC₅₀),以IC₅₀作为后续实验药物浓度。设空白对照组、藏红花素组、藏红花素+IGF-1（PI3K激动剂）组、藏红花素+LY294002（PI3K抑制剂）组，药物干预48 h后，MTT法、Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞增殖抑制率和凋亡率；GFP-LC3荧光质粒转染HepG2细胞后观察自噬小体；Western blot法检测Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、LC3、Beclin-1、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR蛋白表达。结果 藏红花素对HepG2细胞增殖抑制作用呈现一定的剂量依赖性，IC₅₀值为0.78 mmol/L。与空白对照组比较，藏红花素组HepG2细胞增殖抑制率、凋亡率及自噬小体数量显著升高（P<0.05）,Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、LC3-I、LC3-II、Beclin-1表达量及LC3-II/LC3-I比值显著升高（P<0.05）,PI3K、Akt、mTOR磷酸化水平（p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR）显著降低（P<0.05）;IGF-1能够明显逆转藏红花素对HepG2细胞的上述作用，LY294002则能够明显加强藏红花素对HepG2细胞的上述作用（P<0.05）。结论 藏红花素具有促进人肝癌HepG2细胞凋亡和自噬的作用，其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR通路有关。

关键词

藏红花素 / 肝癌 / PI3K/Akt/mTOR通路 / 凋亡 / 自噬