二甲双胍通过miR-342-3p/EGFR/Claudin 1抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移和侵袭

摘要

目的 探究二甲双胍对甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及相关机制。方法 不同浓度二甲双胍处理甲状腺乳头状癌TPC-1细胞48 h, CCK-8方法检测细胞增殖活性，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，RT-qPCR检测细胞miR-342-3p表达。将miR-342-3p inhibitor和阴性对照inhibitor转染TPC-1细胞，20 mmol/L二甲双胍处理48 h, CCK-8检测细胞增殖活性，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，Western blot检测细胞EGFR和Claudin 1蛋白表达。生物信息学分析miR-342-3p与EGFR mRNA的3′非翻译区的潜在结合位点，双荧光素酶报告基因实验验证miR-342-3p与EGFR mRNA结合，通过Western blot检测转染miR-342-3p mimics或miR-342-3p inhibitor对TPC-1细胞EGFR蛋白表达的影响。将EGFR过表达质粒和空载体转染TPC-1细胞，20 mmol/L二甲双胍处理48 h, Western blot检测细胞EGFR和Claudin 1蛋白表达。结果 二甲双胍处理剂量依赖的抑制TPC-1细胞增殖、迁移和侵袭能力，上调细胞miR-342-3p表达。抑制miR-342-3p增加二甲双胍处理的TPC-1细胞增殖、迁移和侵袭能力。miR-342-3p与EGFR mRNA的3′非翻译区结合，过表达miR-342-3p下调TPC-1细胞EGFR蛋白表达且抑制miR-342-3p上调TPC-1细胞EGFR蛋白表达。抑制miR-342-3p或过表达EGFR增加二甲双胍处理的TPC-1细胞EGFR和Claudin 1蛋白表达。结论 二甲双胍可能通过上调miR-342-3p抑制EGFR和Claudin 1表达抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移和侵袭。

关键词

二甲双胍 / 甲状腺乳头状癌 / miR-342-3p / EGFR / Claudin 1 / 迁移 / 侵袭