牛痘病毒介导的IL-24表达通过抑制PI3K-AKT-GSK-3β/β-catenin通路促进卵巢癌的凋亡

摘要

目的 探讨牛痘病毒介导的IL-24基因表达对卵巢癌的调控作用及其机制研究。方法 构建VG9-IL-24重组牛痘病毒，以VG9-IL-24感染SKOV3和IOSE80细胞，酶联免疫吸附法测定细胞上清中IL-24的表达量，IFA检测SKOV3和IOSE80细胞内的VG9-IL-24病毒滴度，MTT法检测细胞活力。分别用PBS、VG9-EGFP和VG9-IL-24感染SKOV3细胞，Hoechst 33258染色观察细胞凋亡情况，流式细胞仪测定细胞凋亡率，Western blot分析Bax、Bcl-2、AKT、p-AKT、PI3K、p-PI3K、GSK-3β、p-GSK-3β和β-catenin蛋白的表达。建立SKOV3肿瘤模型，HE染色和免疫组化染色观察VG9-IL-24的体内抗肿瘤活性。结果 成功构建了VG9-IL-24重组牛痘病毒，经VG9-IL-24感染的SKOV3细胞上清中IL-24表达量显著升高，而在IOSE80细胞中仍保持低水平。0.1 MOI VG9-IL-24感染细胞不同时间点后，VG9-IL-24在SKOV3细胞中快速复制，病毒滴度明显高于IOSE80细胞。VG9-IL-24对IOSE80细胞的毒性作用不大，而使SKOV3细胞活力下降，刺激SKOV3细胞凋亡，抑制细胞p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β和β-catenin蛋白的表达，HE和免疫组化染色进一步证实VG9-IL-24明显抑制SKOV3细胞的增殖。结论 牛痘病毒介导的IL-24基因表达能够通过抑制PI3K-AKT-GSK-3β/β-catenin通路诱导癌细胞凋亡，进而抑制卵巢癌的生长。

关键词

牛痘病毒 / VG9-IL-24 / PI3K-AKT-GSK-3β/β-catenin / 卵巢癌 / 凋亡