长链非编码RNA NEAT1/ILF3通过增强CDK6 mRNA的稳定性促进喉鳞状细胞癌细胞增殖和迁移

摘要

目的 探究lncRNA NEAT1对喉鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响，并进一步探究其机制。方法 将敲减lncRNA NEAT1慢病毒转染喉鳞状细胞癌AMC-HN-8细胞建立稳定敲减lncRNA NEAT1的喉鳞状细胞癌细胞系，RT-qPCR检测细胞lncRNANEAT1表达，CCK-8方法检测细胞增殖活性，Transwell实验检测细胞迁移能力。将稳定转染的细胞皮下注射裸鼠，测量肿瘤体积和质量。将CDK6过表达质粒转染敲减lncRNA NEAT1的喉鳞状细胞癌细胞，Western blot检测细胞CDK6蛋白表达，CCK8和Transwell实验检测过表达CDK6对敲减lncRNA NEAT1的喉鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响。RIP实验验证lncRNA NEAT1与ILF3蛋白结合。用放线菌素D处理喉鳞状细胞癌细胞，RT-qPCR检测过表达ILF3对敲减lncRNA NEAT1的细胞或沉默ILF3对过表达lncRNA NEAT1的细胞CDK6 mRNA降解的影响。结果 敲减lncRNA NEAT1降低AMC-HN-8细胞增殖活性，抑制细胞迁移能力，降低细胞移植瘤体积和质量，下调AMC-HN-8细胞中CDK6蛋白表达。过表达CDK6逆转了敲减lncRNA NEAT1对AMC-HN-8细胞增殖和迁移的抑制作用。lncRNA NEAT1与ILF3蛋白结合。过表达ILF3不影响敲减lncRNA NEAT1对LSCC细胞CDK6 mRNA降解的促进作用，而沉默ILF3逆转了过表达lncRNA NEAT1对LSCC细胞CDK6 mRNA降解的抑制作用。结论 lncRNA NEAT1通过上调CDK6促进LSCC细胞体外增殖和迁移能力和体内肿瘤生长，其机制与其结合ILF3并增强CDK6 mRNA的稳定性有关。

关键词

LncRNA NEAT1 / 喉鳞状细胞癌 / ILF3 / CDK6 / mRNA稳定性 / 增殖 / 迁移