酒精暴露对胰岛β细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌的影响

摘要

目的 探讨急性酒精暴露对小鼠胰岛β细胞MIN6葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)功能的影响及机制。方法 体外培养MIN6细胞，采用线粒体靶向抗氧化剂(Mito-TEMPO)干预，随机分为正常对照组、Mito-TEMPO对照组、20 mmol/L酒精组、Mito-TEMPO预处理+20 mmol/L酒精组。应用MTS法检测细胞存活率；倒置显微镜观察细胞生长情况；RT-PCR检测胰岛素mRNA表达；胰岛素ELISA试剂盒检测GSIS功能；MitoSOX荧光探针法检测线粒体内活性氧(ROS)水平；JC-1法检测线粒体膜电位变化；增强型ATP试剂盒检测ATP水平。结果 与正常对照组相比，20 mmol/L酒精组MIN6细胞存活率、生长状态和胰岛素mRNA表达均未受到明显影响，但GSIS功能下降，且线粒体内ROS水平升高；与20 mmol/L酒精组相比，Mito-TEMPO预处理+20 mmol/L酒精组细胞线粒体内ROS的水平显著降低，MIN6细胞GSIS功能明显增强，且Mito-TEMPO预处理能使细胞内JC-1聚合物红色荧光信号明显增强，ATP生成显著增加。结论 酒精暴露可能通过使MIN6细胞线粒体内ROS增多，导致线粒体氧化损伤、ATP生成减少，进而导致GSIS功能下降。

关键词

酒精 / 糖尿病 / 葡萄糖刺激胰岛素分泌 / 线粒体