间充质干细胞介导VEGF/p38MAPK信号通路对缺血再灌注褥疮大鼠创面修复的影响

摘要

目的 探究间充质干细胞(MSCs)对缺血再灌注褥疮大鼠创面修复的影响及作用机制。方法 取P4代脂肪来源的MSCs,分别用成骨和成脂分化培养基进行诱导培养。成骨分化10 d后对细胞进行茜素红染色，成脂分化14 d后对细胞进行油红O染色。流式细胞术检测MSCs阳性标志物以及阴性标志物。SD大鼠随机分为缺血再灌注褥疮模型组(Model组)、生理盐水对照组(NS组)和MSCs治疗组(MSCs组),每组10只，采用磁铁加压法建立缺血再灌注褥疮模型。计算创面愈合率并采用HE染色观察大鼠褥疮处皮肤组织病理损伤；免疫荧光观察大鼠褥疮处皮肤组织CD31和α-SMA标记的血管数量变化；ELISA方法检测大鼠血清中IL-6、TNF-α和VEGF水平；Western blot检测大鼠褥疮处皮肤组织中p38MAPK蛋白表达。结果 成骨诱导后的MSCs可见深红色钙盐沉积，成脂诱导后的MSCs呈红色串珠样，MSCs阳性表达CD44、CD105和CD90,且阴性表达HLA-DR、CD34、CD19和CD45。MSCs治疗增加缺血再灌注褥疮大鼠创面愈合率，改善大鼠褥疮处皮肤组织病理损伤，增加大鼠褥疮处皮肤组织CD31和α-SMA标记的血管数量，降低大鼠血清中IL-6和TNF-α水平，并增加VEGF水平，降低褥疮处皮肤组织中p38MAPK蛋白表达。结论 MSCs治疗加快褥疮创面修复、改善创面组织病理损伤、促进创面组织血管生成并抑制炎症反应，其机制可能与上调VEGF并下调p38MAPK有关。

关键词

间充质干细胞 / 缺血再灌注褥疮 / VEGF / p38 MAPK / 创面修复 / 血管生成 / SD大鼠