H-2K^b限制性AGR2蛋白CTL表位肽的鉴定及抗黑色素瘤作用

摘要

目的 筛选黑色素瘤肿瘤相关抗原AGR2蛋白来源的H-2K^b限制性CTL表位肽，并鉴定其抗肿瘤效应。方法 Western blot和细胞流式术分别验证AGR2蛋白和H-2K^b基因在小鼠黑色素瘤细胞系B16-F0的表达情况；琼脂糖凝胶电泳筛选得到H-2K^b基因型的小鼠；利用超基序方案SYFPEITHI和IEDB数据库相结合的计算机模拟方法预测得到H-2K^b限制性AGR2-CTL表位肽，并利用分子操作环境（MOE）模拟了H-2K^b限制性AGR2-CTL表位肽与H-2K^b分子的对接，使用Elispot进一步验证其免疫活性。构建小鼠移植瘤模型验证H-2K^b限制性AGR2-CTL表位肽体内抗肿瘤效应，并通过考察小鼠体重、肝肾质量指数、以及血生化指标进行初步安全性评估。结果 AGR2-CTL表位肽AGR2_4-12能够促进干扰素-γ分泌，提高CD8⁺T细胞比例，而对CD4⁺T细胞比例无影响，显著抑制小鼠移植瘤生长，且在小鼠体内并无明显毒性。结论 AGR2_4-12为H-2K^b限制性AGR2蛋白优势CTL表位肽，且具有显著的体内抗肿瘤效应。

关键词

AGR2 / 表位肽 / H-2K^b限制性