尪痹胶囊对膝关节炎大鼠的药效学研究及机制探讨

摘要

目的 研究尪痹胶囊对膝骨关节炎大鼠的治疗作用，并结合网络药理学探讨其作用机制。方法 将60只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组(盐酸氨基葡萄糖，0.13 g/kg)、尪痹胶囊高、中、低剂量组(2.97 g/kg, 1.48 g/kg, 0.74 g/kg),用前交叉韧带横断术(ACLT)加内侧半月板切除术(MMX)造模。酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，苏木精-伊红(HE)和番红O-固绿染色观察关节软骨组织病理学变化，免疫组化(IHC)检测关节软骨中MMP13、CollagenⅡ蛋白的表达。通过检索TCMSP、TCMID、SwissTargetPrediction数据库及相关文献，收集并筛选尪痹胶囊的主要化学成分及靶点；通过OMIM、GeneCards数据库获取膝骨关节炎疾病靶点；利用Venny 2.1.0、STRING数据库及CytoScape软件筛选关键靶点并进行KEGG通路富集分析；使用Autodock对关键靶点进行分子对接。结果 与假手术组相比，模型组的Mankin评分、血清中的IL-1β和TNF-α、软骨中MMP 13蛋白水平显著升高，软骨中的CollangenⅡ蛋白水平显著降低(P<0.05),而尪痹胶囊治疗组和阳性给药组相较于模型组中炎性因子和蛋白的表达具有显著逆转作用。经网络药理学获得尪痹胶囊与疾病关键靶点75个，得到与骨关节炎相关通路为TNF、PI3K-AKT、EGFR信号通路，将关键靶点中TP53、AKT1、IL-6、EGFR、TNF分别与山柰酚、木犀草素、beta-谷甾醇、槲皮素、熊果酸5中关键成分进行分子对接。结论 尪痹胶囊能有效治疗膝骨关节炎，并预测其可能是通过干预TNF、PI3K/AKT信号通路实现的。

关键词

尪痹胶囊 / 膝骨关节炎 / 软骨退变 / MMP 13 / CollagenⅡ