miR-130a-5p靶向PCGF1调节CXCL8/NF-κB/SLC7A11信号通路促进胶质瘤细胞铁死亡

摘要

目的 探究miR-130a-5p靶向PCGF1对胶质瘤细胞铁死亡的影响及机制。方法 将U87细胞分为mimics NC组、miR-130a-5p mimics组、miR-130a-5p mimics+Vector组和miR-130a-5p mimics+PCGF1组，并用Lipofectamine 3000转染试剂进行转染。RT-qPCR方法检测各组细胞中miR-130a-5p以及PCGF1和CXCL8 mRNA表达；Western blot方法检测各组细胞中PCGF1、p-NF-κB p65和SLC7A11蛋白表达；CCK-8方法检测各组细胞的细胞活力；铁含量检测试剂盒检测各组细胞中铁含量；DHE探针检测各组细胞中ROS水平；ELISA方法检测各种细胞中MDA含量。生物信息学预测miR-130a-5p与PCGF1 mRNA的潜在结合位点并采用双荧光素酶报告基因实验验证二者结合。结果 过表达miR-130a-5p降低胶质瘤细胞的细胞活力，增加细胞中铁沉积、ROS水平和MDA含量。PCGF1结合miR-130a-5p,过表达miR-130a-5p降低胶质瘤细胞中PCGF1 mRNA和蛋白表达。过表达PCGF1部分逆转过表达miR-130a-5p对胶质瘤细胞的细胞活力的下调作用以及细胞中铁沉积、ROS水平和MDA含量的上调作用。过表达miR-130a-5p降低胶质瘤细胞中CXCL8 mRNA以及p-NF-κB p65和SLC7A11蛋白表达，过表达PCGF1部分逆转过表达miR-130a-5p对胶质瘤细胞中CXCL8 mRNA以及p-NF-κB p65和SLC7A11蛋白表达的下调作用。结论 miR-130a-5p通过靶向抑制PCGF1表达诱导胶质瘤细胞铁死亡，其机制可能与抑制CXCL8/NF-κB/SLC7A11信号通路激活有关。

关键词

胶质瘤 / 铁死亡 / miR-130a-5p / PCGF1 / CXCL8/NF-κB/SLC7A11信号通路