5-氮杂胞苷介导ADAMTS8对乳腺癌MDA-MB-231细胞的抑制作用及机制

摘要

目的 探究5-氮杂胞苷(5-AzaC)逆转ADAMTS8 DNA甲基化对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和血管生成的影响及机制。方法 MDA-MB-231细胞分为Control组、5-AzaC组、5-AzaC+sh-NC组和5-AzaC+sh-ADAMTS8组。RT-qPCR检测各组细胞中ADAMTS8 mRNA表达情况；甲基化特异性PCR检测各组细胞中ADAMTS8 DNA甲基化水平；Western blot检测各组细胞中ADAMTS8和EGFR/MAPK信号通路相关蛋白的表达；CCK-8和Transwell分别检测各组细胞增殖以及迁移和侵袭能力；管形成实验检测各组细胞共培养的HUVEC管形成能力。结果 给予DNA去甲基化药物5-AzaC后，乳腺癌细胞中ADAMTS8表达水平显著上调，DNA甲基化水平显著下调。给予5-AzaC抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭以及与其共培养的血管内皮细胞管形成能力，敲减ADAMTS8部分逆转5-AzaC对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭以及与其共培养的血管内皮细胞管形成能力的抑制作用。给予5-AzaC下调乳腺癌细胞中p-EGFR、p-ERK1/2、p-JNK和p-p38蛋白表达，敲减ADAMTS8部分逆转5-AzaC对乳腺癌细胞中p-EGFR、p-ERK1/2、p-JNK和p-p38蛋白表达的下调作用。结论 5-AzaC通过上调ADAMTS8表达抑制乳腺癌细胞体外增殖、迁移、侵袭和血管生成，其机制与抑制EGFR/MAPK信号通路激活有关。

关键词

乳腺癌 / 5-氮杂胞苷 / DNA甲基化 / ADAMTS8 / EGFR/MAPK信号通路