过表达miR-203a-3p抑制P65-GLS1促进肝癌细胞凋亡

摘要

目的 探讨miR-203a-3p调控P65-GLS1对肝癌细胞周期及免疫逃逸的影响。方法 qRT-PCR检测肝上皮细胞L02、人肝癌细胞株Bel-7402、HepG2、MHCC97H中miR-203a-3p的表达。HepG2细胞分为肝癌组（无转染的人HepG2细胞）、miR-203a-3p-siRNA组（人HepG2细胞转染miR-203a-3p-siRNA）、miR-203a-3p-mimics组（人HepG2细胞转染miR-203a-3p-mimics）、NC组（人HepG2细胞转染miR-203a-3p-NC）。采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率、周期；免疫印迹检测各组细胞CD46、CD55、CD59蛋白及NF-κB、NF-κBp65及GLS1蛋白；荧光素酶观察miR-203a-3p对NF-κBp65及GLS1的调控作用；Pearson分析miR-203a-3p与NF-κBp65及GLS1的相关性。结果 与人正常肝细胞L02相比，人肝癌细胞株Bel-7402、HepG2、MHCC97H中miR-203a-3p相对表达明显降低。miR-203a-3p-mimics能促进HepG2细胞凋亡，延长细胞G₁期，缩短G₂期；抑制HepG2细胞CD46、CD55、CD59蛋白表达，抑制NF-κB、NF-κBp65及GLS1蛋白表达；miR-203a-3p-mimics能靶向结合NF-κBp65及GLS1的3′UTR;miR-203a-3p与NF-κBp65、GLS1表达呈负相关性。结论 miR-203a-3p可调控肝癌细胞周期，增加凋亡率改善肝癌细胞免疫逃逸，与靶向抑制NF-κBp65及GLS1水平相关。

关键词

肝癌 / miR-203a-3p / 核转录因子κBp65 / 肾型谷氨酰胺酶 / 免疫逃逸