miR-541-5p靶向HMGB1促进子宫内膜癌细胞凋亡

摘要

目的 微小RNA(miRNAs)通过影响其靶基因的表达，被认为是子宫内膜癌(EC)发展的潜在调控因子。本研究旨在探讨miR-541-5p在EC中的作用及其调节细胞增殖、迁移和凋亡的机制。方法 以正常子宫内膜组织或子宫内膜上皮细胞系(hEEC)作为对照组，RT-qPCR法检测EC组织或EC细胞中miR-541-5p和HMGB1 mRNA的表达情况；Western blot法与免疫组化法检测组织HMGB1蛋白的表达量；过表达miR-541-5p后，MTT法检测EC细胞增殖、Annexin V-FITC-PI双染试剂盒检测EC细胞的凋亡；Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax和Cleaved-caspase 3、Bcl-2的表达；荧光素酶检测法探索miR-541-5p和HMGB1潜在的靶向关系。通过敲除和过表达HMGB1探索其对EC细胞增殖、迁移和凋亡的影响。结果 EC组织和细胞中miR-541-5p表达下调，而HMGB1 mRNA与蛋白水平均升高(P<0.05)。过表达miR-541-5p可抑制EC细胞的增殖并诱导细胞凋亡(P<0.05)。此外，Western blot检测显示，miR-541-5p可以促进Bax和Cleaved-caspase 3并抑制HMGB1、Bcl-2的表达(P<0.05)。敲除HMGB1也抑制了细胞的生长并诱导细胞凋亡(P<0.05)。此外，荧光素酶报告基因检测显示HMGB1和miR-541-5p之间有直接结合(P<0.05)。过表达HMGB1部分逆转了miR-541-5p对EC细胞增殖、凋亡的作用(P<0.05)。结论 miR-541-5p在EC患者和EC细胞系中表达下调。过表达miR-541-5p通过靶向HMGB1,抑制EC细胞增殖并诱导细胞凋亡。

关键词

子宫内膜癌 / miR-541-5p / HMGB1 / 增殖 / 迁移 / 凋亡