基于DLL4/Notch1信号通路探讨人参皂苷Rg-3对AOM/DSS诱导的炎症相关性结直肠癌小鼠血管形成机制

摘要

目的 基于Delta样配体4（delta-like ligand 4,DLL4）/Notch1信号通路探究人参皂苷Rg-3对氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠（azoxymethane/dextran sulphate sodium, AOM/DSS）诱导的炎症相关性结直肠癌小鼠血管形成机制。方法 48只C57BL/6J APC^Min/+小鼠随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rg-3组（10 mg/kg）,每组16只。建立AOM/DSS诱导的结直肠癌模型，采集腹主动脉血与完整结直肠组织，检测血常规与炎症指标，HE染色观察肠组织形态，免疫组化、Western blotting检测肠组织DLL4、Notch1表达。肿瘤细胞、人脐静脉内皮细胞（human umbilical vascular endothelial cells, HUVECs）分为对照组、人参皂苷Rg-3组、人参皂苷Rg-3+DLL4组，通过MTT、克隆形成、划痕、Transwell与血管形成实验检测细胞增殖、迁移、血管形成能力，Western blotting检测DLL4/Notch信号通路、血管形成相关分子表达情况。结果 与对照组相比，模型组、人参皂苷Rg-3组RBC、Hct、Hb水平降低（P<0.05）,IL-1β、IL-6、TNF-α、DLL4、Notch1表达水平升高（P<0.05）;与模型组相比，人参皂苷Rg-3组RBC、Hct、Hb水平提高（P<0.05）,IL-1β、IL-6、TNF-α、DLL4、Notch1表达水平下降（P<0.05）,肿瘤数量、2～3.5 mm及>3.5 mm的肿瘤数量减少（P<0.05）。细胞实验结果显示，与对照组相比，人参皂苷Rg-3组肿瘤细胞、HUVECs增殖、克隆形成、迁移、血管形成能力下降（P<0.05）,DLL4、Notch1、VEGF、VEGFR2、转录因子重组信号结合蛋白Jκ（recombination signal binding protein-Jκ,RBP-Jκ）、Hes1表达水平降低（P<0.05）。结论 人参皂苷Rg-3通过抑制DLL4/Notch1信号通路促进血管形成，抑制AOM/DSS诱导结直肠癌进展。

关键词

Delta样配体4/Notch信号通路 / 人参皂苷Rg-3 / 炎症 / 结直肠癌 / 血管形成