癌胚性TUFT1过表达及基因转录干预对肝细胞癌的抑制作用

摘要

目的 分析肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）釉丛蛋白（tuftelin, TUFT1）表达及基因转录干预的抑制作用。方法 收集术后HCC组织和癌旁组织，分析TUFT1表达；从不同肝癌细胞和对照肝LO2细胞株中提取TUFT1,以免疫印迹法筛选TUFT1低或过表达的癌细胞株；将已构建含TUFT1基因或干扰TUFT1-shRNA3的慢病毒质粒，分别转染低或过表达TUFT1的癌细胞株，以CCK-8法、划痕、Transwell法、流式细胞术等分析细胞增殖、侵袭、迁移等生物学行为；将稳定表达TUFT1的两种细胞株皮下接种裸鼠，分析对移植瘤生长的影响。结果 肝癌组织TUFT1过表达，主要定位于细胞浆和细胞膜。肝癌组TUFT1阳性率为87.1%,均显著高于癌旁组（χ²=18.563,P<0.001）;肝癌细胞株中TUFT1表达明显高于LO2细胞（P<0.001）。体外研究，以有效的TUFT1-shRNA3质粒，转染高TUFT1表达的MHCC-97H细胞，在TUFT1功能丧失后癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著抑制，凋亡率升高；以插入TUFT1基因的质粒，转染低TUFT1表达的Hep3B细胞，在TUFT1功能获得后癌细胞增殖、侵袭和迁移能力均显著增强。体内研究，将功能丧失的MHCC-97H细胞于裸鼠皮下接种，移植瘤中TUFT1下调，并显著抑制瘤体生长（Z=12.000,P<0.01）。结论 TUFT1为癌胚性蛋白，对其干预有望成为潜在的HCC治疗的分子靶目标。

关键词

肝细胞癌 / 釉丛蛋白 / 转录干预 / 生物学行为 / 移植瘤

基金资助

国家自然科学基金项目(31872738,81673241); 南通市传染病防治联盟基金项目(202308001)