基于网络药理学和实验验证的黄芪多糖拮抗TNF-α表达减轻小鼠代谢相关脂肪性肝病的作用机制研究

摘要

目的 基于网络药理学方法推测黄芪多糖（astragalus polysaccharides, APS）治疗代谢相关脂肪性肝病（metabolic-associated fatty liver diseases, MAFLD）相关机制并开展动物实验进行验证。方法 采用网络药理学方法找到APS的活性成分并利用数据库挖掘APS及MAFLD相关靶点并对以上靶点取交集，绘制交集靶点蛋白质相互作用网络图和核心靶点网络图。进行动物实验验证，将21只小鼠随机平均分为3组，分别为正常对照组、MAFLD模型组及MAFLD模型+APS干预组。MAFLD模型+APS干预组小鼠予以高脂饲料喂养8周，同时将APS以剂量为50 mg·kg^-1·d^-1对小鼠连续灌胃8周；MAFLD模型组及正常对照组小鼠分别以高脂饲料、标准维持饲料喂养8周，同时用等体积生理盐水对小鼠连续灌胃8周。给药结束后观察小鼠一般情况，计算肝指数，取小鼠肝脏组织进行HE染色，酶联免疫吸附实验测定小鼠血清及肝脏组织中TNF-α的含量，免疫组织化学方法分析小鼠肝脏组织中TNF-α的表达情况。结果 通过网络药理学方法获得APS相关作用靶点292个，获得MAFLD相关作用靶点2 254个，二者交集靶点104个。经过分析后筛选出22个APS治疗MAFLD的核心靶点，TNF为其中之一且节点大、颜色深，提示TNF是APS治疗MAFLD过程中重要的靶点之一。动物实验结果显示，与MAFLD模型组小鼠相比，APS的干预可以显著降低MAFLD小鼠的体质量、肝湿重及肝指数（P<0.01）。APS可以在组织病理学上改善MAFLD小鼠的肝脏组织。APS的干预还可以降低MAFLD小鼠血清及肝脏组织中TNF-α的浓度（P<0.05）。小鼠肝脏组织免疫组化实验结果显示，APS干预组小鼠阳性表达区域面积显著低于MAFLD模型组（P<0.001）。结论 基于网络药理学及动物实验结果可知TNF是APS治疗MAFLD的重要靶点之一，APS可以通过拮抗TNF-α表达来减轻小鼠MAFLD。

关键词

黄芪多糖 / 代谢相关脂肪性肝病 / TNF-α / 网络药理学 / 动物实验