非酒精性脂肪性肝炎AML-12体外模型建立

摘要

目的 分析并评价不同比例浓度梯度OA/PA诱导的非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)炎症体外模型。方法 通过采用不同比例浓度梯度OA/PA(2∶3或2∶1)诱导AML-12细胞建立NASH炎症体外模型；收集细胞OA/PA(500μmol/L∶250μmol/L)诱导AML-12株CCK-8检测细胞毒性或存活率；油红O染色观察其胞内脂肪变性；qRT-PCR或Western blotting检测细胞内TNF-α、IL-6和TGF-β1 mRNA含量。结果 得出不同比例浓度的OA/PA混合药物刺激24 h或48 h后，OA/PA以2∶1比例(500μmol/L+250μmol/L)等摩尔比混合后，细胞毒性明显低于2∶3的OA/PA(200μmol/L+300μmol/L)浓度(P<0.05);刺激48 h后，模型组细胞内脂滴及IL-6和TNF-α mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论 以2∶1比例的OA(500μmol/L)/PA(250μmol/L)混合药物诱导下成功建立NASH炎症AML-12体外模型。

关键词

非酒精性脂肪性肝炎 / AML-12 / 体外模型 / OA / PA

基金资助

深圳市基础研究(面上项目)(JCYJ20220530163602006); 昆明市科技局项目(2023-1-NS-006); 2017年度云南省医疗卫生单位内设研究机构科研项目(2017NS334); 云南省卫生和计划生育委员会医学领军人才培养计划(L-2017008)