KPC1基因通过调节NF-κB p50/HIF-1α通路对WT小鼠肝切除后肝再生过程和修复过程的机制研究

摘要

目的 分析Kip1泛素-促进复合体1(Kip1 ubiquitination-promoting complex 1,KPC1)基因通过调节NF-κB p50/HIF-1α通路对WT小鼠肝切除后肝再生过程和修复过程的机制研究。方法 60只WT小鼠分为假手术(Sham)组、PHx术后1 d组、2 d组、4 d组、6 d组、8 d组，Sham组仅打开腹腔暴露肝脏，不做肝切除手术，其余小鼠切除肝脏左叶、中叶，在对应术后天数处死小鼠。检测小鼠肝功能(ALT、AST)和肝脏再生指数，EdU实验检测肝组织再生情况，Western blotting检测细胞Ki67、TGF-β1、KPC1、NF-κB p50/HIF-1α通路蛋白，RT-qPCR检测KPC1 mRNA水平。40只WT小鼠分为PHx组、Ad-shKPC1组、Ad-shKPC1+p50抑制剂组、Ad-shKPC1+HIF-1α抑制剂组，用于探究NF-κB p50/HIF-1α通路在KPC1介导肝再生中的作用。结果 与Sham组比较，PHx术后1 d、2 d、4 d、6 d、8 d肝脏比明显降低，ALT、AST显著升高(P<0.05);与Sham组比较，PHx术后1 d、2 d、4 d、6 d、8 d的EdU阳性率、Ki67、TGF-β1、p-p50、HIF-1α、VEGF-A蛋白表达显著升高，KPC1 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),其中术后2 d达到峰值(P<0.05);与PHx组比较，Ad-shKPC1组、Ad-shKPC1+p50抑制剂组、Ad-shKPC1+HIF-1α抑制剂组EdU阳性率明显减少，Ki67、TGF-β1、p-p50、HIF-1α、VEGF-A蛋白表达显著降低(P<0.05),且Ad-shKPC1组上述各指标改善幅度小于Ad-shKPC1+p50抑制剂组、Ad-shKPC1+HIF-1α抑制剂组。结论 敲除KPC1通过抑制NF-κB p50/HIF-1α通路进而抑制WT小鼠肝切除后肝再生和修复过程。

关键词

KPC1 / NF-κB p50/HIF-1α通路 / 肝切除术 / 肝再生 / 肝修复

基金资助

国家自然科学基金(82270299); 湖北省科技计划项目(2021DFE026); 湖北医药学院研究生科技创新项目(YC2023030)