土茯苓缓解CCl₄诱导的大鼠肝纤维化进程及其机制

摘要

目的 探讨土茯苓对四氯化碳（carbon tetrachloride, CCl₄）诱导的肝纤维化大鼠的抗肝纤维化作用及其机制。方法 雄性SPF级SD大鼠44只，随机取8只为正常对照组，其余36只大鼠每周连续3 d腹腔注射1 mL/kg CCl₄（用40%茶油稀释）诱导肝纤维化，持续4周。将造模成功的大鼠随机分为模型组、土茯苓组、土茯苓稀释组，每组8只。土茯苓组、土茯苓稀释组每天灌胃给药1次，连续5 d,剂量按60 kg成人400 mL换算，正常对照组、模型组用等量生理盐水对照。用流式细胞术检测全血调节性T细胞（Treg）阳性率；HE染色观察大鼠肝组织炎症和纤维化的病理学改变；IHC染色检测肝组织相关细胞因子蛋白的表达。结果 与模型组相比，土茯苓组的Treg比例在末次给药后7 d、14 d、28 d显著上调；与模型组相比，土茯苓稀释组的Treg比例只在28 d时显著上调。HE染色结果显示土茯苓组相比模型组肝组织中炎细胞浸润明显减少，纤维化程度显著下降；IHC染色结果显示与模型组比较，土茯苓组、土茯苓稀释组大鼠肝组织中CD4、CD8、IL-2、IL-10、IFN-γ蛋白阳性区域OD值显著升高（P<0.05）,IL-4、IL-6、TNF-α、TLR4阳性区域OD值均显著降低（P<0.05）,土茯苓组比土茯苓稀释组改变更为明显。结论 土茯苓对CCl₄诱导的肝纤维化大鼠具有抗纤维化作用，且其效果与浓度相关。机制可能是通过调节Th17/Treg细胞平衡，增加全血Treg细胞阳性率，影响细胞因子表达，发挥抗炎抗肝纤维化的作用。

关键词

土茯苓 / 四氯化碳 / 肝纤维化 / 调节性T细胞 / 细胞因子

基金资助

浙江省中医药防治重大疾病研究计划项目(2018zy012); 浙江省医药卫生面上项目(2021ky1018); 宁波市自然基金项目(2019A610367)