GLDC基因在结直肠癌中的表达及临床意义研究

摘要

目的 探讨甘氨酸脱羧酶（glycine decarboxylase, GLDC）在结直肠癌（colorectal cancer, CRC）组织中的表达水平和临床意义。方法 采用免疫组织化学法检测2014年1月至2017年1月180例CRC患者的癌组织和癌旁组织GLDC的表达，跟踪随访至2025年1月，分析GLDC表达与患者临床病理特征、生存及预后的关系。采用Western blotting、RT-PCR法检测GLDC蛋白和核酸的表达水平，筛选GLDC表达高且稳定的CRC细胞株，采用RNA干扰技术沉默GLDC基因的表达，将细胞分为si-NC组、si-GLDC组，通过CCK-8法、Transwell小室迁移、细胞划痕实验和流式细胞术检测细胞的增殖、迁移和凋亡能力。结果 134例CRC组织及53例癌旁组织的GLDC高表达（P<0.01）,χ²检验分析CRC患者的临床病理特征，发现GLDC水平与年龄、肿瘤大小、浸润深度、转移情况、病理分期相关（P<0.001）。Kaplan-Meier生存曲线分析发现，GLDC高表达是患者总生存期（overall survival, OS）较差的危险因素。GLDC在HCT-116细胞株的蛋白和核酸的相对表达量最高，分别为5.80±0.07、6.47±0.20,差异有统计学意义（P<0.001）。敲低HCT116中GLDC的表达，发现在GLDC-1485组中的核酸和蛋白的相对表达量最低，差异有统计学意义（P<0.001）,故选取GLDC siRNA-1485进行后续实验。si-NC组、si-GLDC组HCT-116细胞培养24 h后OD值分别为0.94±0.53、0.78±0.32,差异有统计学意义（P<0.001）,进一步比较细胞增殖活力si-GLDC组低于si-control组，差异有统计学意义（P<0.001）,si-NC组、si-GLDC组迁移细胞数分别为124±2.08、79±2.52（P<0.0001）,相对划痕愈合率分别为（41.44±1.47）%、（34.59±1.32）%,差异有统计学意义（P=0.0039）。si-NC组、si-GLDC组细胞凋亡率分别为（3.28±0.06）%、（25.73±0.29）%,差异有统计学意义（P<0.0001）。结论 异常表达的GLDC基因参与了CRC的发生发展，促进癌细胞的迁移、局部浸润，与患者的不良预后有关，有望成为CRC靶向治疗的潜在靶点。

关键词

结直肠癌 / 细胞增殖 / 细胞凋亡 / 甘氨酸脱氢酶 / 基因靶向治疗