OSW-1通过调控PI3K/AKT/NF-κB信号通路诱导肝细胞癌凋亡及自噬

摘要

目的 评估虎眼万年青皂苷(ornithogalum saundersiae saponin, OSW-1)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)细胞凋亡及自噬的影响，确定其潜在的机制。方法 采用转录组测序技术(RNA-seq)筛选OSW-1作用于HEP3B细胞相关的信号通路，并利用细胞集落形成实验，分析OSW-1和细胞增殖之间的联系。伤口愈合实验确定细胞迁移以及侵袭水平，基于流式细胞术分析细胞凋亡，RT-qPCR分析凋亡相关联基因表达水平，免疫荧光分析LC3B的表达情况，Western blotting分析OSW-1对细胞内的p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT、p-NF-κB、NF-κB、LC3B和p62蛋白表达的影响。结果 OSW-1显著抑制HEP3B、SK-HEP-1细胞增殖、迁移和侵袭，且随给药浓度的增加抑制效果增强。流式细胞术结果表明HEP3B和SK-HEP-i细胞发生了凋亡，RT-qPCR表明Caspase-3、Bax的表达增加，Bcl-2表达水平下调，免疫荧光结果表明LC3B荧光强度显著增强。OSW-1诱导HEP3B和SK-HEP-1细胞内的p-PI3K、p-AKT、p-NF-κB、p62的蛋白表达下降，LC3B的蛋白表达升高。结论 OSW-1具有显著的抗肝癌活性，能够通过PI3K/AKT/NF-κB通路促使细胞发生凋亡及自噬。

关键词

肝细胞癌 / 虎眼万年青皂苷 / 凋亡 / 自噬 / PI3K/AKT/NF-κB信号通路