毛蕊异黄酮调控GSK-3β/Nrf2/GPX4铁死亡通路逆转结直肠癌5-FU耐药的研究

摘要

目的 研究毛蕊异黄酮(calycosin, CA)调控糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)/核因子-E2相关因子2(nuclear factor erythroid-derived 2-like 2,Nrf2)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)铁死亡通路逆转结直肠癌5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)耐药。方法 选择5-FU耐药的结直肠癌细胞株HT-29/5-FU为实验对象，采用CCK8法检测5-FU、CA、5-FU+CA对细胞增殖的影响，计算逆转耐药倍数。采用克隆形成实验检测克隆形成数目，采用试剂盒检测结直肠癌细胞中ROS和MDA水平，采用Western blotting方法检测细胞中GSK-3β、Nrf2、GPX4的表达水平。结果 100μmol/L CA逆转HT-29/5-FU细胞对5-FU耐药，逆转倍数为2.65倍；CA、5-FU单用或联合作用于HT-29/5-FU细胞均能显著减少克隆形成以及Nrf2、GPX4表达，增加ROS、MDA水平及GSK-3β表达；与CA、5-FU单用比较，CA和5-FU联用进一步减少克隆形成以及Nrf2、GPX4表达，增加ROS、MDA水平及GSK-3β表达。结论 CA逆转结直肠癌细胞株5-FU耐药，其涉及的机制可能与调控GSK-3β/Nrf2/GPX4通路、激活铁死亡相关。

关键词

结直肠癌 / 5-FU耐药 / 毛蕊异黄酮 / GSK-3β/Nrf2/GPX4通路 / 铁死亡