通过RNA-seq探究全反式维甲酸对肝细胞癌细胞及正常肝细胞的影响

摘要

目的 探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid, ATRA)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)细胞HepG2及正常肝细胞CCC-HEL-1转录组的影响，并评估其作为HCC治疗药物时可能引发的肝细胞损伤风险。方法 利用公共数据库分析视黄酸受体α(retinoic acid receptor alpha, RARA)的表达；采用RNA测序(RNA-seq)技术比较ATRA处理前后HepG2及CCC-HEL-1细胞的差异表达基因，结合GO、KEGG富集分析及蛋白互作网络(protein-protein interaction, PPI)的构建，系统分析ATRA调控的功能通路；通过流式细胞术检测ATRA对HepG2及CCC-HEL-1细胞凋亡的影响。统计学分析采用GraphPad Prism 10软件，组间比较依据数据分布情况选用独立样本t检验或Mann-Whitney U检验。结果 公共数据库分析显示，RARA在HCC组织中表达水平显著高于正常肝组织。ATRA处理诱导HepG2细胞中1 768个基因差异表达，主要富集于PPAR信号通路、脂肪酸代谢、细胞凋亡等功能途径，表现为显著抑制增殖并促进凋亡；在CCC-HEL-1细胞中，ATRA诱导393个差异表达基因，涉及脂质代谢、TGF-β信号、细胞外基质重塑等过程。流式细胞术进一步验证了ATRA对HepG2细胞凋亡的促进作用，ATRA在促进HCC细胞凋亡的同时，也对正常肝细胞CCC-HEL-1产生一定的凋亡诱导作用。结论 ATRA具有促进HCC细胞凋亡的抗肿瘤活性，但同时也会造成正常肝细胞的损伤。本研究提示在临床应用ATRA治疗HCC时，应综合评估其对正常肝细胞的影响，考虑联合肝保护策略以优化疗效并降低药物相关肝损伤风险。

关键词

全反式维甲酸 / 肝细胞癌 / 肝细胞损伤 / 转录组测序 / 细胞凋亡 / 肝保护

基金资助

首都临床特色诊疗技术研究及转化应用(Z221100007422002); 中德合作交流项目(M-0200)