miR-2114-3p通过靶向Siglec-15对肝细胞癌增殖、迁移的影响

摘要

目的 探讨miR-2114-3p通过靶向Siglec-15对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)增殖、迁移的影响。方法 采用生物信息学方法，从miRWalk及TargetScan数据库中下载数据集，筛选与Siglec-15存在靶向关系miRNA。双荧光素酶实验证明miR-2114-3p与Siglec-15之间的靶向关系。RT-qPCR检测miR-2114-3p在正常肝细胞和HCC细胞中的表达。分别在SMMC-7721细胞中转染miR-2114-3p类似物(miR-2114-3p mimic)/阴性对照(NC mimic)、miR-2114-3p抑制剂(miR-2114-3p inhibitor)/阴性对照(NC inhibitor)、Siglec-15敲低质粒；随后在Siglec-15敲低组中共转miR-2114-3p抑制剂(miR-2114-3p inhibitor)/阴性对照(NC inhibitor),RT-qPCR法检测各组细胞Siglec-15 mRNA及miR-2114-3p mRNA的表达量，Western blotting检测Siglec-15的蛋白表达水平，MTT法检测各组癌细胞的增殖情况，划痕实验检测各组癌细胞迁移情况。结果 miR-2114-3p在HCC细胞中的相对表达量明显较正常肝细胞低(P<0.05)。miR-2114-3p mimic组与miR-2114-3p NC mimic组相比抑制了细胞的增殖和迁移(P<0.05),且在该组HCC细胞中Siglec-15的表达水平在基因和蛋白层面均显著降低(P<0.05);miR-2114-3p inhibitor组与miR-2114-3p NC inhibitor组相比促进了细胞的增殖和迁移(P<0.05),且Siglec-15的表达水平在基因和蛋白层面均显著升高(P<0.05)。与对照组相比，Siglec-15敲低质粒组Siglec-15在基因和蛋白层面的表达水平显著降低，且在该组肝癌细胞中抑制了细胞的增殖和迁移(P<0.05);Siglec-15敲低组共转miR-2114-3p inhibitor组与Siglec-15敲低组共转NC inhibitor组相比，可逆转Siglec-15的表达水平，并促进细胞的增殖和迁移。结论 miR-2114-3p在HCC细胞中低表达，miR-2114-3p敲低后，HCC细胞的增殖、迁移能力提高，并且通过靶向其下游基因Siglec-15的表达来影响HCC的进展。

关键词

miR-2114-3p / Siglec-15 / 肝癌 / 增殖 / 迁移