结直肠癌患者外周血Tfh细胞中PD-1和CTLA4的共表达模式及临床意义

摘要

目的 探讨结直肠癌（colorectal cancer, CRC）患者外周血滤泡辅助性T细胞（T follicular helper cell, Tfh）中程序性死亡受体-1（programmed death-1,PD-1）和细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4（cytotoxic T-lymphocyte-associated protein 4,CTLA4）的共表达模式及临床意义。方法 纳入2020年1月至2020年12月在我院治疗的75例CRC根治术后的患者，30例结直肠息肉病理证实为腺瘤性息肉患者作为病例对照组和30名健康体检者作为健康对照组，留取空腹外周血标本，提取外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells, PBMC）,流式细胞术检测Tfh细胞上PD-1和CTLA4的表达水平，并评估其与CRC临床特征的关系。采用Spearman等级相关分析Tfh细胞上PD-1和CTLA4的共表达模式与TNM分期的相关性。采用二元Logistic回归分析影响CRC发病的危险因素。结果 CRC组中Tfh细胞、PD-1⁺CTLA4^-Tfh、PD-1^-CTLA4⁺Tfh和PD-1⁺CTLA4⁺Tfh细胞比例显著高于病例对照组和健康对照组（P<0.001）,病例对照组与健康对照组上述细胞亚群的差异无统计学意义（P>0.05）。CRC患者PD-1⁺CTLA4^-Tfh、PD-1^-CTLA4⁺Tfh、PD-1⁺CTLA4⁺Tfh细胞比例在TNM分期、淋巴结转移、肝转移方面存在显著差异（P<0.05）,Spearman等级相关分析结果显示，TNM分期Ⅰ～Ⅱ期患者与Ⅲ～Ⅳ期患者相比，Tfh细胞比例差异无统计学意义（P>0.05）,而PD-1⁺CTLA4^-Tfh、PD-1^-CTLA4⁺Tfh和PD-1⁺CTLA4⁺Tfh细胞比例与TNM分期呈显著正相关（r=0.815、0.860、0.872,P<0.001）。二元Logistic回归模型分析显示，PD-1⁺CTLA4^-Tfh、PD-1^-CTLA4⁺Tfh和PD-1⁺CTLA4⁺Tfh的高表达均是CRC发病的危险因素，其中以PD-1⁺CTLA4⁺Tfh最具临床效能。结论 CRC患者外周血Tfh细胞上PD-1和CTLA4的高表达及共表达与疾病的发生发展密切相关，两者在Tfh细胞上具有协同抑制作用，共同促进了T细胞耗竭，导致CRC发生免疫逃逸，PD-1和CTLA4有望成为CRC新的治疗靶点。

关键词

结直肠癌 / Tfh / PD-1 / CTLA4 / 危险因素