白花蛇舌草总黄酮调节HIF-1α/VEGF通路对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭、血管生成拟态的影响

摘要

目的 探讨白花蛇舌草总黄酮（flavonoids of oldenlandia diffusa, FOD）调节缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）/血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）通路对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭、血管生成拟态的影响。方法将肝癌Hep3B细胞分为对照（Control）组、FOD低剂量（FOD-L）组、FOD高剂量（FOD-H）组、FOD-H+pc-NC组和FOD-H+pc-HIF-1α组；qRT-PCR检测各组细胞HIF-1α mRNA和VEGF mRNA表达水平；MTT法检测细胞增殖；Matrigel胶三维培养观察体外血管生成拟态（vasculogenic mimicry, VM）情况；细胞划痕实验检测细胞迁移；Transwell检测细胞侵袭；流式细胞仪检测细胞凋亡；蛋白免疫印迹检测VEGF-A、VE-cadherin、HIF-1α、VEGF、PCNA、cleaved caspase-3、E-cadherin、N-cadherin、vimentin蛋白表达水平。结果 与Control组比较，FOD-L组和FOD-H组Hep3B细胞HIF-1α和VEGF mRNA表达水平、OD₄₉₀（24 h、48 h）值、管样结构数量、划痕愈合率、细胞侵袭数量、N-cadherin、vimentin、PCNA、VEGF-A、VE-cadherin、HIF-1α和VEGF蛋白表达水平降低，凋亡率、E-cadherin和cleaved caspase-3蛋白表达水平升高（P<0.05）;与FOD-H+pc-NC组比较，FOD-H+pc-HIF-1α组Hep3B细胞HIF-1α和VEGF mRNA表达水平、OD₄₉₀（24 h、48 h）值、管样结构数量、划痕愈合率、细胞侵袭数量、N-cadherin、vimentin、PCNA、VEGF-A、VE-cadherin、HIF-1α和VEGF蛋白表达水平升高，凋亡率、E-cadherin和cleaved caspase-3蛋白表达水平降低（P<0.05）。结论 FOD对Hep3B细胞的增殖、迁移、侵袭和VM具有抑制作用，并可诱发细胞凋亡，可能与抑制HIF-1α/VEGF信号通路有关。

关键词

白花蛇舌草总黄酮 / HIF-1α/VEGF通路 / 肝癌细胞 / 增殖 / 侵袭 / 血管生成拟态