脂多糖联合D-氨基半乳糖致小鼠急性肝衰竭模型的构建及机制研究

摘要

目的 使用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)联合D-氨基半乳糖(D-galactosamine, D-GalN)构建稳定急性肝衰竭(acute liver failure, ALF)小鼠动物模型，并探讨其导致ALF的机制。方法 设置3个D-GalN/LPS给药剂量，通过生存曲线确定最佳剂量，在最佳剂量下，将SPF级56只ICR小鼠随机分为空白对照(T0组)、染毒2 h(T2组)、染毒4 h(T4组)、染毒6 h(T6组)、染毒8 h(T8组)、染毒10 h(T10组)和染毒12 h(T12组)(n=8)。检测各组肝功能、细胞损伤标志物HMGB-1、细胞因子TNF-α、抗氧化酶CAT、GSH、SOD和过氧化物MDA随时间的变化趋势，对比模型组与空白组细胞因子IL-10、IL-1β、IL-6、炎症小体NLRP3、坏死性凋亡相关蛋白p-MLKL和RIP3的表达情况。通过HE染色、电子显微镜观察小鼠组织病理变化。结果 D-GalN(800 mg/kg)和LPS(20μg/kg)为最佳剂量，其24 h死亡率为50%。肝损伤标志物ALT和AST于给药后第8小时达峰，该节点为最佳取材节点。D-GalN/LPS可促进p-MLKL和RIP3蛋白表达，提高肝组织HMGB-1、TNF-α、IL-1β、IL-6和MDA水平，降低IL-10、CAT、GSH和SOD水平。结论 D-GalN/LPS可诱导肝细胞坏死性凋亡，促进肝细胞氧化应激进而促进肝组织炎症从而导致ALF。

关键词

急性肝衰竭 / 动物模型 / 坏死性凋亡 / 氧化应激 / 炎症

基金资助

国家自然科学基金青年项目(82305175); 四川省中西医结合学会科研专项课题(ZXY2025014); 成都医学院“成医英才”登峰计划(2024kjTzn06)