miR-96对牦牛颗粒细胞凋亡和增殖的影响

摘要

为研究牦牛卵巢组织内miR-96对颗粒细胞凋亡、增殖及激素分泌的影响，本试验通过采集成年牦牛卵巢内颗粒细胞，分离培养后将其分为4个处理组，分别转染miR-96模拟物（mimics）和抑制物（inhibitor）及两者的阴性对照（NC）后培养并检测颗粒细胞受到的影响。使用流式细胞术和CCK-8法对细胞凋亡和增殖情况进行检测，采用qPCR和Western Blot检测凋亡相关基因表达情况，ELISA检测转染后类固醇激素分泌情况。结果表明：miR-96-mimics使颗粒细胞凋亡发生抑制促进细胞增殖，并促使凋亡相关基因Bcl-2表达极显著升高，Bax表达极显著降低；ELISA检测类固醇激素水平变化显示，与mimics NC组相比miR-96-mimics组细胞培养液中孕酮（P4）分泌水平极显著降低，雌二醇（E₂）分泌水平极显著升高；与inhibitor NC组相比miR-96-inhibitor组孕酮（P4）分泌水平极显著升高，雌二醇（E₂）分泌水平显著降低。miR-96可促进颗粒细胞增殖并抑制凋亡，同时会对生殖激素分泌产生影响，从而参与调控牦牛卵泡发育与闭锁的过程。

关键词

牦牛 / miR-96 / 颗粒细胞 / 凋亡 / 增殖