柴达木马马胃蝇三期幼虫鉴定及遗传进化分析

摘要

为了解青海海西地区柴达木马体内寄生胃蝇三期幼虫的种类及其遗传进化特征，为该地区柴达木马马胃蝇病的综合防控提供数据支撑，本研究对采集的15个马胃蝇三期幼虫样本，使用体式显微镜对其外部形态进行鉴定，采用PCR技术扩增样本线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅱ(COX Ⅱ)基因片段，并利用DnaSP v6.0软件对所得序列进行单倍型及核苷酸多态性分析，通过PhyloSuite v1.2.3软件与从GenBank数据库中下载的胃蝇科及狂蝇科序列进行比对，并基于比对结果构建系统发育树，以明确样本的系统分类地位。结果表明：采集的15个马胃蝇三期幼虫体色呈暗红色，共有11个体节，形态特征与黑腹胃蝇三期幼虫一致。分子结果显示，15个样本的DNA序列与黑腹胃蝇的相似性高达99.5%,鉴定为黑腹胃蝇。经单倍型和核苷酸多样性分析，获得的15条柴达木马黑腹胃蝇线粒体COX Ⅱ基因序列共有7个单倍型，以黑腹胃蝇单倍型1(GpH1)为主，单倍型多样性指数为0.006 78,核苷酸多样性指数为0.032 25,多态性分析共有24个变异位点。系统发育树表明，从柴达木马获得的黑腹胃蝇有7个单倍型序列与GenBank数据库中的黑腹胃蝇NC029812、MG815607和MG815628聚为同一分支，与肠胃蝇、红尾胃蝇、黑角胃蝇和鼻胃蝇分属不同分支，与羊狂蝇的遗传距离较远。此次从柴达木马体内采集到的胃蝇蛆为黑腹胃蝇，以GpH1单倍型为主。

关键词

柴达木马 / 黑腹胃蝇 / COX Ⅱ / 单倍型 / 系统发育分析