二苯乙烯苷调控PI3K/AKT信号通路干预SH-SY5Y细胞凋亡的机制研究

摘要

目的：探讨二苯乙烯苷（TSG）经PI3K/AKT通路对冈田酸诱导的人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）凋亡的影响及调控机制。方法：CCK-8法筛选OA最佳浓度，将SH-SY5Y细胞分为对照组、模型组、TSG组、 LY294002组和LY294002+TSG组。通过CCK-8法和TUNEL法检测各组细胞增殖和凋亡情况；Western blotting法和qRT-PCR法检测PI3K、P-PI3K(Y607)、AKT、P-AKT(Ser473)、Bcl-2、Bax蛋白及mRNA表达情况，通路及凋亡蛋白相对表达量以P-PI3K(Y607)/PI3K、P-AKT(Ser473)/AKT、Bcl-2/Bax灰度比值表示。结果：OA最佳处理浓度为40 nmol/L。与对照组相比，模型组细胞活力降低，细胞凋亡率升高，通路及凋亡蛋白、PI3K、AKT、Bcl-2 mRNA表达水平降低，Bax mRNA表达水平升高（均P<0.05）；与模型组相比，TSG组细胞活力升高，细胞凋亡率降低，通路及凋亡蛋白、PI3K、AKT、Bcl-2 mRNA相对表达水平升高，Bax mRNA表达水平降低（均P<0.05）,LY294002组细胞活力降低，细胞凋亡率升高，P-PI3K(Y607)/PI3K蛋白表达水平显著降低（P<0.05）、P-AKT(Ser473)/AKT、Bcl-2/Bax蛋白表达水平较明显降低，但未有统计学意义，PI3K、AKT、Bcl-2 mRNA表达水平降低，Bax mRNA表达水平升高（均P<0.05）；与LY294002组相比，LY294002+TSG组细胞活力升高，细胞凋亡率降低，通路及凋亡蛋白相对表达水平、PI3K、AKT、Bcl-2 mRNA升高，Bax mRNA表达水平降低（均P<0.05）。结论：二苯乙烯苷可能通过干预PI3K/AKT信号通路，进而调节Bcl-2、Bax等凋亡因子的表达，从而缓解冈田酸诱导的SH-SY5Y细胞凋亡。

关键词

二苯乙烯苷 / 阿尔茨海默症 / 磷酸肌醇-3激酶抑制剂 / 磷酸肌醇3-激酶/蛋白激酶B / 细胞增殖 / 细胞凋亡