表没食子儿茶素没食子酸酯对脓毒症肠道损伤的影响及机制研究

摘要

目的：探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gallate,EGCG）对脓毒症大鼠肠道损伤的影响及机制。方法：随机将32只雄性SD大鼠分为假手术组（Sham组）、脓毒症组（CLP组）、脓毒症+EGCG组（EGCG组）、脓毒症+GSK2606414干预组（GSK组），每组各8只。Sham组开腹后仅观察盲肠后立即关腹；CLP组采用盲肠结扎穿孔术；EGCG组在CLP术后腹腔注射50 mg/kg的EGCG;GSK组在CLP术前一周每天予100 mg/kg的GSK2606414灌胃。造模术后24 h处死4组大鼠，留取并保存血清及肠道组织标本。苏木素-伊红染色观察大鼠肠道病理学变化。酶联免疫测定法检测大鼠血清中IL-1β、IL-6水平。免疫组化观察肠道组织中磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶（p-PERK）、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12(Caspase-12)、紧密连接蛋白-1(Claudin-1)的阳性面积百分比。蛋白印迹法（Western blotting,WB）检测大鼠肠道组织中p-PERK、蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）、CHOP、Caspase-12、Claudin-1的表达。结果：CLP组大鼠肠道肠绒毛结构严重破坏，镜下可见大量炎性细胞浸润；EGCG组和GSK组较CLP组病理损伤减轻，CLP组Chiu′s评分较EGCG组和GSK组明显升高（P<0.05）。CLP组大鼠血清IL-1β、IL-6水平均较Sham组明显升高，EGCG组和GSK组血清炎症因子水平均较CLP组显著降低（P<0.05）。CLP组大鼠肠道组织中p-PERK、CHOP、Caspase-12阳性面积百分比较Sham组均明显升高，EGCG组和GSK组大鼠肠道组织上述指标阳性面积百分比较CLP组均明显降低（P<0.05）;CLP组大鼠肠道组织中Claudin-1阳性面积百分比较Sham组均明显降低，EGCG组和GSK组大鼠肠道组织上述指标阳性面积百分比较CLP组均明显升高（P<0.05）。CLP组大鼠肠道组织中p-PERK、CHOP、Caspase-12蛋白表达水平均高于Sham组，EGCG组和GSK组上述指标水平均低于CLP组（P<0.05）;CLP组大鼠肠道组织中Claudin-1蛋白表达水平均低于Sham组，EGCG组和GSK组上述指标水平均高于CLP组（P<0.05）。结论：表没食子儿茶素没食子酸酯对脓毒症肠道损伤有一定的治疗作用，其机制可能与抑制内质网应激性凋亡通路相关。

关键词

脓毒症 / 肠道损伤 / 表没食子儿茶素没食子酸酯 / 内质网应激 / 凋亡